Špecifické kroky na extrakciu chlorofylu cez fragmentáciu buniek pomocou ultrazvukového drviča buniek

Ultrazvukový drvič buniek využíva disperzný efekt ultrazvuku v kvapaline na vytvorenie kavitácie, čím sa rozbijú pevné častice alebo bunkové tkanivá v kvapaline.
Rozvoj biologického priemyslu zvýšil požiadavky na experimenty využívajúce ultrazvukové bunkové drviče, ako je meranie a kontrola teploty vzorky, zlepšenie úrovne inteligencie nízkoteplotných chladiacich vzoriek a celého stroja atď.
Špecifické kroky na extrakciu chlorofylu pomocou ultrazvukového drvenia buniek pomocou ultrazvukového drviča buniek:
1. Odstreďte alebo prefiltrujte vzorku vody a na nasávací filter nainštalujte filtračnú membránu z acetátových vlákien. Nalejte kvantitatívny objem vzorky vody na filtráciu a podtlak počas filtrácie by nemal byť príliš vysoký (asi 50 kPa). Po odobratí vzorky vody pokračujte v ťahaní 1-2 minút, aby ste znížili vlhkosť na membráne filtra. Ak je potrebné krátkodobé skladovanie po dobu 1-2 dní, môže sa skladovať v bežnej chladničke na zmrazenie. Ak sa vyžaduje dlhodobé skladovanie (30 dní), malo by sa uchovávať v chladničke pri nízkej teplote (-20 stupeň ).
2. Vyberte filtračnú membránu obsahujúcu fytoplanktón a sušte ju pri nízkej teplote v chladničke počas 6-8 hodín. Nakrájajte ho na malé kúsky nožnicami a vložte do 5 ml alebo 10 ml centrifugačnej skúmavky. Pridajte 3-4 ml 90 % acetónu, aby sa fragmenty ponorili pod hladinu kvapaliny. Umiestnite fragmenty do ultrazvukovej nádoby a použite ultrazvukové vlny na rozbitie buniek vzorky. (Porovnávanie experimentov v rôznych časoch a frekvenciách na uľahčenie identifikácie * času a frekvencie fragmentácie pre jednotné metódy).
3. Odstreďte vzorku podrobenú fragmentácii buniek pomocou ultrazvuku pomocou centrifúgy (3000-4000r/min) počas 10 minút. Nalejte supernatant do 5 ml alebo 10 ml odmernej banky. Zrieďte na 5 ml alebo 10 ml 90% acetónom a dobre pretrepte.
4. Umiestnite supernatant na spektrofotometer a pomocou 1 cm kolorimetrickej misky s optickou dráhou odčítajte hodnoty absorbancie pri vlnových dĺžkach 750 nm, 663 nm, 645 nm a 630 nm. Na korekciu absorbancie vzorky použite 90 % acetón ako slepé meranie absorbancie.